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灵芝孢子粉对肿瘤癌症究竟有没有作用或者帮助

灵芝是一种珍贵的药用真菌,现代医学研究证明,灵芝具有多方面的生理活性与药理作用。已有研究报道,灵芝具有抑制肿瘤、调节机体免疫、降血压、消炎镇静等功效,并有强的抗氧化作用,但对其潜在的一些保健功能仍需进一步研究和开发。本文以小鼠骨髓细胞微核率和小鼠睾丸染色体畸变率及S - 180和H - 22瘤细胞小鼠移植性肿瘤为观察指标,对灵芝孢子粉的抗突变和抑制肿瘤的保健作用进行了研究。
摘 要:
目的 对灵芝孢子粉的抗突变和抗肿瘤作用进行研究,为开发灵芝的保健作用提供依据。
方法 以小鼠骨髓细胞微核实验和睾丸染色体畸变实验观察灵芝孢子粉的抗突变作用,以S - 180瘤细胞和H - 22瘤细胞移植性肿瘤观察灵芝孢子粉的抗肿瘤效果。
结果 灵芝孢子粉对环磷酰胺诱发的小鼠骨髓细胞微核发生和丝裂霉素诱发的小鼠睾丸细胞染色体畸变均有明显的抑制效果。对S - 180和H - 22肿瘤细胞小鼠移植性肿瘤生长也有明显的抑制作用。结论 灵芝孢子粉对体细胞和生殖细胞的DNA损伤均有保护作用,对肿瘤也有一定的预防效果。
1 材料与方法
  1.1 实验材料 灵芝孢子粉人体推荐量为每日6g ,相当于01100g/ kg·体重。试验动物为昆明种小鼠(二级) ,由中国医学科学院实验动物所繁育场提供(动物合格证号医动字第01- 3001号) 。S - 180及H - 22瘤细胞株均购自中国医学科学院药物研究所。
  1.2 实验方法
  1.2.1 小鼠骨髓细胞微核试验  健康雄性小鼠40只,体重为26.0~28.7g ,随机分为4组,致突变物对照组和高、中、低3个剂量组,每组10只。将灵芝孢子粉用蒸馏水溶解稀释,高、中、低剂量分别为3.0 ,1.0和0.33g/ kg ,分别相当于人体推荐量的30 ,10 ,3.3倍,经口灌胃给受试物,连续30 d ,灌胃量为0.4 ml/ 20g体重。对照组同时以蒸馏水灌胃。试验末期(最后2 d) ,受试物组及致突变物对照组经口给予致突变物环磷酰胺(40 mg/ kg·体重)2次(中间间隔24 h) 。第2次给予阳性物后6 h颈椎脱臼法处死小鼠,取胸骨骨髓常规制片,每只小鼠计数1 000个嗜多染红细胞,计数微核率,以 ‰表示。结果采用泊松分布统计。
  1.2.2 小鼠睾丸染色体畸变试验  健康雄性小鼠40只,体重为26.0~30.8g ,分组和受试物剂量均同小鼠骨髓细胞微核试验。经口灌胃给受试物,连续30 d ,给受试物第17 d受试物组及致突变物对照组经口给予丝裂霉素C 2 mg/(kg·体重)1次,受试物组继续给予受试物13 d后处死动物,处死动物前6 h腹腔注射秋水仙素4 mg/(kg·体重) ,取动物双侧睾丸,去被膜,分离曲细精管,用0.1 %的柠檬酸钠低渗,甲醇和冰醋酸(3∶1)固定,制片, Gimesa 染色,油镜镜检各组分散良好的初级精母细胞畸变率和染色体畸变类型。结果采用泊松分布统计。
  1.2.3 动物移植性肿瘤试验
  1.2.3.1 S - 180瘤细胞株试验  雄性昆明种小鼠,体重18~22g。实验动物随机分为正常对照组和高、中、低3个剂量组,每组12只动物,受试物剂量同小鼠骨髓细胞微核试验。经口灌胃给受试物,灌胃第13 d ,在无菌条件下,于右侧腋窝皮下接种S - 180肿瘤细胞〔5×106细胞/ (0.2 ml/只)〕。接种后继续给受试物,11 d 后,颈椎脱臼处死小鼠,取出瘤体称重。结果采用单因素方差分析统计。
  2.3.1.2 H - 22瘤细胞株试验  雄性昆明种小鼠,体重18~22g。动物分组和受试物剂量同小鼠骨髓细胞微核试验。经口灌胃给受试物,灌胃第13 d ,在无菌条件下,于右侧腋窝皮下接种H - 22瘤细胞(5×106细胞/ 0.2瘤ml/只) ,接种后继续给予受试物,11 d 后,颈椎脱臼处死小鼠,取出瘤体称重。结果采用单因素方差分析统计。
  2 结果
  2.1 小鼠骨髓细胞微核试验(表1)给小鼠灵芝孢子粉低、中、高各剂量组的微核率分别为29.4‰, 27.0‰, 25.4‰,均低于阳性环磷酰胺对照组32.4‰,且中、高剂量组与对照组比有显著性差异( P< 0.05, P< 0.01) 。
  2.2 小鼠睾丸染色体畸变试验(表2) 给小鼠灵芝孢子粉的各剂量组的染色体畸变细胞率均低于阳性物丝裂霉素组,仅高剂量组与对照组比较有显著性差异( P< 0.05) 。常染色体和性染色体分离各实验组与对照组比较无显著性差异。
  表1 灵芝孢子粉对环磷酰胺诱发的小鼠骨髓细胞微核的影响
  表2 灵芝孢子粉对丝裂霉素诱发的小鼠睾丸细胞染色体畸变的影响
 
  2.3 灵芝孢子粉对肿瘤的抑制效果
  2.3.1 对小鼠接种S - 180瘤细胞后肿瘤生长的影响(表3)给小鼠灵芝孢子粉低、中、高剂量组小鼠的瘤重均低于对照组,且均有显著性差异( P< 0.05, P< 0.01) 。
  表3 灵芝孢子粉对S - 180瘤细胞小鼠瘤重的影响( …x±s)
 
  2.3.2 对小鼠接种H - 22瘤细胞后肿瘤生长的影响(表4) 给小鼠灵芝孢子粉各剂量组小鼠的瘤重均低于对照组,但仅高剂量组与对照组比较有显著性差异( P< 0.05) 。
  表4 灵芝孢子粉对H - 22瘤细胞
  3 讨论
  微核是染色体受损后的染色体片段,其频率可反映细胞DNA受损的程度,因此小鼠骨髓细胞微核是反映体细胞接触致突变物和致癌物的遗传毒性的敏感指标。小鼠睾丸染色体畸变是反映生殖细胞DNA损伤的敏感指标,而DNA损伤是组织癌变的重要机制,与癌症的危险性相关。本次研究发现,灵芝孢子粉在剂量为310 ,110g/(kg·体重)时,对环磷酰胺诱导的小鼠骨髓细胞微核发生率有明显的抑制作用,说明该灵芝孢子粉对致突变剂诱导的小鼠体细胞突变有拮抗作用。当剂量为310g/(kg·体重)时,对丝裂霉素诱导的小鼠睾丸染色体畸变有抑制作用,说明灵芝孢子粉对化学物诱导的生殖细胞损伤也有保护作用。对小鼠移植性肿瘤的研究发现,灵芝孢子粉对S - 180和H - 22瘤细胞移植性肿瘤均有抑制效果,说明对动物肿瘤具有抑制作用。灵芝是一种珍贵的中草药,含有多种有效成分,如多种氨基酸、多糖和锌、硒、钼等多种人体必需微量元素。研究报道,灵芝对肿瘤有一定的预防作用,可预防肿瘤、调节机体免疫,增强机体耐力〔2〕。其抗肿瘤的有效成分主要是一种灵芝多糖(B -葡聚糖) ,其预防肿瘤的机制,一方面与其增强机体免疫力有关。如报道,灵芝多糖可增加机体天然杀伤细胞活性,另一方面可能是灵芝促进了机体肝脏对致突变物与致癌物的解毒从而保护机体DNA损伤而起到预防肿瘤作用。我们的研究结果也证明灵芝对机体DNA损伤的保护作用和肿瘤的抑制作用,与文献研究报道一致〔3〕。大量研究己证明灵芝有多种保健功能,但由于灵芝成分复杂,在利用灵芝的保健功能上仍有许多研究和开发之处,尚有待进一步研究。
  参考文献:
  〔1〕 Lee J M , Kwon H ,J eong H ,et al. Inhibition of lipidperoxidation and oxidative DNA damage by Ganoderma lucidum [J] . Phytot herRes ,2001 ,15(3) :245 - 249 .
  〔2〕 鲁进宇. 灵芝多糖对小鼠免疫功能的影响[J] .中国药学杂志,1995 ,1 :10 .
  〔3〕 王冠福. 灵芝胶囊对小鼠特异性抗体与肿瘤坏死因子和产生以及抗S - 180肉瘤的作用[J] .上海免疫学杂志,1995 ,3 :30 .

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